HPLC 是高效率液態層析儀,
你可以想像一般的管柱層析,只不過以高壓高流速來粹取,
優點是可回收樣品,注入的樣品量較少,分離樣品快速,
但這些都是針對在一般分析時的需求,
如果是針對需要回收樣品的話,它的量太少,需要多次分離,
雖然最近有可以一次打幾個mg的管柱出現,用於分離較低分子量的peptide,
例如我剛合成一段peptide,但可能不是很乾淨,
此時便可使用HPLC來分離出我需要的樣品。
FPLC 是快速液態層析儀,
其實其原理跟HPLC差不多,一樣是用pump來加壓加速分離的,
但它的管柱和HPLC不一樣,其管柱外殼一律是用塑膠材質,
故使用的壓力與流速,便不像HPLC那麼強,(哪種塑膠我就不知道囉)
它主要是用來分離蛋白質用的,可以分離的量也較大,
很多人一定會覺得奇怪,用HPLC也是一樣的呀,為何一定要用FPLC呢??
這是因為蛋白質可能會跟HPLC的金屬管壁鍵結(bind)在一起,
如此就得不到所要的蛋白質了,
且蛋白質也可能因為高壓而變性,也是得不到想要的蛋白質,
價格上HPLC較便宜,大概30萬就能買到不錯的了...
而FPLC就要很多錢囉,而且台灣這邊只有一個香港商的安法瑪亞在代理,
貴死囉,我實驗室那一台沒有電腦連線的好像就要五十萬吧,型號我忘了,
在維修上呢,HPLC較FPLC簡單(找人來一下子就解決了),FPLC常出問題,
一下子O ring老化要換,一下子pump的酒精不夠要加,
而當過壓的情形太常發生時,就代表著過濾部份的membrane要換了...
煩的呢...
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