2009年5月14日 星期四

生技實驗中有那些方法可用以破壞菌體細胞?

打破菌體的方法,主要可分兩類:
1.物理法
a.使用機械力,如研磨、壓力、超音波震盪等等
b.使用溫度變化,如液態氮或負70度C冷凍使菌體內的水因此
變成固態結晶,而破壞其細胞膜等結構,
待解凍後就會使該部分產生孔洞。

2.化學法
a.利用鹽濃度不同導致滲透壓差異,使細菌漲破。
b.使用藥劑或酵素分解其細胞膜
吾人常用的solution I、II系列即綜合使用上述觀念,另外
某Q牌kit教人在其lysis buffer中加入lysozyme也是這個原因。

c.利用熱使細胞膜破裂,算是既有物理法也有化學法,一方面
使用熱使細胞澎漲同時脂質流動性增高進而導致細胞瓦解,
另一方面,熱使得細胞膜上的蛋白質等變性而失去功能等。

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