製作Competent cells

全程On ice

1.Stock cells 由-20(-80)℃解凍取20λ+20 ml LB (1%) ->37℃ overnight

取1%(200λ+20ml LB) -> refresh 2hr 37℃。

2.離心 8000 rpm,4℃,5min 去上清液 (flow 內執行)。
1~2 min
加CaCl2(100mM)10ml(1/2菌液量) 彈一彈打散----->離心5000rpm,5min,4℃

3.去上清液->加CaCl2 100mM with glycerol 3ml 打散 -->分裝300λ/eppendorf 約十管
於-20(-80)℃保存。